ראש עיריית תל אביב יפו, רון חולדאי, מסר כי ״טבח השנאה הנורא שאירע באורלנדו הוא טרגדיה נוספת בשורת האירועים שאנו חווים לאחרונה. שוב קיבלנו תזכורת כואבת על כך שהטרור ממשיך להכות בכל מקום בארץ ובעולם. אני שולח תנחומיי למשפחות ההרוגים והפצועים שהטרור קטע באכזריות את שגרת חייהם".
עוד הוסיף כי "לפני זמן קצר שלחתי מכתב תנחומים בשמי ובשם תושבי תל אביב-יפו למושל פלורידה ולראש עיריית אורלנדו. ישראל וארצות הברית חולקות את אותם ערכים של חופש וזכויות הפרט לכל אדם. לצערי הרב ישנם אנשים שנוקטים באלימות אכזרית כדי לאיים על דרך חיינו ועל ערכינו. אסור לנו לתת לטרור להשיג את מטרתו ולעצור את חיינו. הערב נאיר את בניין העירייה בצבעי דגל ארצות הברית, דגל ישראל ודגל הגאווה - מתוך הזדהות עם קרבנות הפיגוע והפגנת סולידריות עם ידידינו האמריקאים״.
לדבריו, "שוחחתי עם ראש עיריית אורלנדו והבעתי בפניו את צערי לאבדן החיים האמריקאים. הצעתי את כל העזרה ואנחנו נעשה מה שצריך. אנו מביעים תודה גם לכוחות המשטרה שהגיבו לאירוע במקצועיות רבה, הצילו חיים ועצרו את המקרה זה מלהפך לאסון קשה יותר. לעולם לא נוכל להודות להם מספיק. זה בהחלט יום שובר לב לנו ולכל חברינו בקהילה הלהט"בית", אמר הנשיא האמריקאי.
עוד התייחס למקום בו בוצע הירי ואמר כי "היורה כיוון למועדון בו אנשים באו לחיות, לרקוד, ולשיר והם הותקפו במקום של סולידריות וכוח. מקום בו אנשים באים לעורר מודעות ולהביע דעתם בכל מה שקשור לזכויות אדם, כלומר - שהתקרית הזאת נוגעת לכל אמריקאי באשר הוא כיוון שזו פגיעה בכולנו. זו פגיעה בכל מי שמאמין בעקרונות של המדינה שלנו. אלה הם הערכים שהופכים אותנו לאמריקאים".